Inkubationswanne

ASPERGILLUS Western Blot (WB) IgG ist ein Einwegtest für den qualitativer serologischen IgG-Diagnose mittels Immunoblot-Assay auf Aspergillose, der als Bestätigungstest bei einem positiven oder mehrdeutigen Ergebnis in klassischen Screeningtests vorgesehen ist.      TESTPRINZIP  Western Blot Technik   Die Antigene Aspergillus fumigatus werden nach der Trennung durch Elektrophorese mittels Elektroblotting an die Oberfläche einer Nitrocellulosemembran gebunden (Transfer genannt), die in 24 von 1 bis 24 nummerierte Streifen geschnitten wird.      DURCHFÜHRUNG   Jede zu prüfende Serumprobe wird separat mit einem Streifen inkubiert. Die potenziell in der Probe vorhandenen Anti-Aspergillus-Antikörper binden selektiv an die Antigene. Das alkalische Phosphatase Anti-Human-IgG Konjugat bindet dann an die gebundenen Anti-A. fumigatus-Antikörper. Abschließend reagieren die Immunkomplexe mit dem Substrat. Die in den Proben vorhandenen, von den Anti-Aspergillus-Antikörpern erkannten Antigene vom Typ IgG werden als violette querverlaufende Banden dargestellt.         ASPERGILLOSE    Aspergillose sind Infektionen, die durch allgegenwärtige Pilze der Gattung Aspergillus verursacht werden. Verschiedene induzierte Pathologien hängen von mehreren intrinsischen Eigenschaften des Pilzes selbst und seines Wirts ab, die die Virulenz der Krankheit beeinflussen.   Unter Hunderten von Aspergillus-Arten gelten derzeit mehr als 20 als für den Menschen pathogen, es werden jedoch regelmäßig neue pathogene Arten identifiziert (Gauthier et al., 2016).  Allerdings ist Aspergillus fumigatus die am häufigsten vorkommende Art der Gattung. Es wird geschätzt, dass es für mehr als 80 % der pathologischen Manifestationen beim Menschen verantwortlich ist, dieser Anteil variiert jedoch je nach klinischer Form und geografischer Lage.

ECHINOCOCCUS Western Blot (WB) IgG ist ein Einwegtest für den qualitativer serologischen IgG[1]Diagnose mittels Immunoblot-Assay auf alveoläre Echinokokkose und zystische Echinokokkose (Hydatidose), der als Bestätigungstest bei einem positiven oder mehrdeutigen Ergebnis in klassischen Screeningtests vorgesehen ist.   TESTPRINZIP Western Blot-Technik Die Antigene (Larven des Echinococcus multilocularis) werden nach der Trennung durch Elektrophorese mittels Elektroblotting an die Oberfläche einer Nitrocellulosemembran gebunden (Transfer genannt), die in 24 von 1 bis 24 nummerierte Streifen geschnitten wird.   DURCHFÜHRUNG Jede zu prüfende Serumprobe wird separat mit einem Streifen inkubiert. Die potenziell in der Probe vorhandenen Anti-Echinococcus-Antikörper binden selektiv an die Antigene. Das alkalische Phosphatase Anti-Human-IgG-Konjugat bindet dann an die gebundenen Anti-Echinococcus-Antikörper. Abschließend reagieren die Immunkomplexe mit dem Substrat. Die in den Proben vorhandenen, von den Anti-Echinococcus-Antikörpern erkannten Antigene vom Typ IgG werden als violette querverlaufende Banden dargestellt.     ECHINOCOCCOSIS  Bei Echinokokken handelt es sich um parasitäre Zoonosen, die durch Bandwurmlarven der Gattung Echinococcus verursacht werden, die den Darm von Wild- und Haushunden befallen. Neben Hunden (meist Hunde und Füchse bei E. multilocularis) kommen auch Katzen als zufällige Endwirte vor. Der Mensch infiziert sich ebenso wie die anderen Allesfresser- und Pflanzenfresser-Zwischenwirte durch die Aufnahme von Eiern, die in der Natur ausgeschieden werden oder sich im Fell des Endwirts befinden. Die Übertragung auf den Menschen erfolgt in der Regel durch den Verzehr von nicht ausreichend gespültem Obst oder Gemüse, das durch Fäkalien des Endwirts kontaminiert ist. Das Ei setzt eine Larve frei, die durch den Blut- oder Lymphstrom wandert, bevor sie hauptsächlich von der Leber, aber auch von anderen Organen wie der Lunge aufgehalten wird. Larven entwickeln sich in Zysten, die entweder zunehmend größer werden können (E. granulosus) oder Knospen bilden, die beim Ablösen sekundäre Zysten bilden (E. multilocularis) (Woolsey & Miller, 2021).

PEO Western Blot (WB) IgG ist ein qualitativer Einwegtest zur serologischen IgG-Diagnose mittels Immunoblot-Assay auf Vogelbrüter-Lungenkrankheit (BBD) - extrinsische allergische Alveolitis (EAA) mit Vogelantigenen - der als Bestätigungstests eines positiven oder zweifelhaften Ergebnis in klassischen Screeningtests.   TESTPRINZIP Western Blot-Technik Die Milchantigene der Jungtierkulturen werden nach der Trennung durch Elektrophorese mittels Elektroblotting an die Oberfläche einer Nitrocellulosemembran gebunden (Transfer genannt), die in 24 von 1 bis 24 nummerierte Streifen geschnitten wird.   DURCHFÜHRUNG Jede zu prüfende Serumprobe wird separat mit einem Streifen inkubiert. Die potenziell in der Probe vorhandenen Anti-Leishmania-Antikörper binden selektiv an die Antigene. Das alkalische Phosphatase Anti-Human-IgG-Konjugat bindet dann an die gebundenen Antikörper. Abschließend reagieren die Immunkomplexe mit dem Substrat. Die in den Proben vorhandenen, von den Anti-Antikörpern erkannten Antigene vom Typ IgG werden als violette querverlaufende Banden dargestellt.   PEO (BBD) Die Bird Breeder’s Lung Disease (BBD) ist die häufigste Form der Hypersensitivitätspneumonitis (HP oder extrinsische allergische Alveolitis (EAA)) (Ismail et al., 2006, Rouzet et al., 2014). HP ist eine Gruppe immunallergischer Lungenerkrankungen. Sie werden bei prädisponierten Patienten durch das wiederholte Einatmen von Antigenen verursacht, d. h. nicht-eigenen Molekülen, die vom Immunsystem erkannt und angegriffen werden. Diese Partikel sind größtenteils organisch (Mikroorganismen, tierische oder pflanzliche Proteine…), können aber auch aus Chemikalien stammen (Chauvin et al., 2021). Bei BBD handelt es sich bei den Antigenen um Vogelproteine, die im Kot der Vögel und in ihrer unmittelbaren Umgebung (z. B. Federn und Staub von Käfigen) vorkommen. Seine Epidemiologie ist wenig bekannt, aber die Literatur schätzt, dass ein großer Teil der Züchter und Besitzer betroffen ist, laut der Studie zwischen 5 und 21 % (Christensen et al., 1975, Lopez & Salvaggio, 1987, Rodriguez de Castro et al. , 1993).   Die Vogelzüchter-Lungenkrankheit hat zwei Formen: akute und chronische, die ihrerseits in fibrotische und nicht-fibrotische Formen unterteilt werden können (Costabel et al., 2020, Chan et al., 2012).   Die akute Form tritt nach starker Einwirkung von Vogelproteinen auf. Charakteristisch sind Kurzatmigkeit und Hustenanfälle, begleitet von Fieber, Schüttelfrost, Ohnmacht, Myalgie und Kopfschmerzen. Die Symptome treten 4 bis 8 Stunden nach der Exposition gegenüber dem Antigen auf und bilden sich 24 Stunden nach Beendigung der Exposition zurück (Bourke & Boyd, 1997, Chan et al., 2012).

TOXOPLASMA WB IgG-IgM ist ein Einwegtest für den Vergleich von IgG- und IgM-immunologischen Profilen mittels Immunoblot-Assay (CIP-WB), der zur Diagnose folgender Erkrankungen bestimmt ist: • Kongenitale Toxoplasmose bei der Geburt (T0): CIP-WB G+M zwischen dem mütterlichen Blut und dem Nabelschnurblut. • Kongenitale Toxoplasmose während der postnatalen Nachsorge (T+N): CIP-WB G+M zwischen dem Nabelschnurblut zum Zeitpunkt T0 und dem Blut des Kindes zum Zeitpunkt T+N. • Okuläre Toxoplasmose: CIP-WB IgG zwischen dem Serum des Patienten und dem Kammerwasser. Dieser Test ist nicht zur Erkennung oder Bestätigung isolierter Serologien bestimmt. Für diese Anwendung ist der Test LDBIO TOXO II IgG (Ref. TOXO II IgG WB) vorgesehen.   TESTPRINZIP Western Blot-Technik Die Antigene von Toxoplasma gondii werden nach der Trennung durch Elektrophorese mittels Elektroblotting an die Oberfläche einer Nitrocellulosemembran gebunden (Transfer genannt), die in 24 von 1 bis 24 nummerierte Streifen geschnitten wird.   DURCHFÜHRUNG Anmerkung: Die IgG, oder IgM Immunoblot Tests werden bei der Anwendung zeitgleich durchgeführt. Immunoblot IgG Der Test besteht in der separaten Inkubation der Serumproben (oder Kammerflüssigkeit), deren immunologischen Profile verglichen werden sollen, mit aneinandergrenzenden Streifen, die aus demselben Transfer stammen. • Schritt 1: Jede zu prüfende Serumprobe (oder Kammerwasser) wird separat mit einem Streifen inkubiert. Die potenziell in der Probe vorhandenen Anti-Toxoplasma-Antikörper binden selektiv an die Antigene von T. gondii. • Schritt 2: Das alkalische Phosphatase Anti-Human-IgG-Konjugat bindet dann an die gebundenen Anti[1]Toxoplasma-Antikörper. • Schritt 3: Abschließend reagieren die Immunkomplexe mit dem Substrat. Die in den Proben vorhandenen, von den Anti-Toxoplasma-Antikörpern der Klasse IgG erkannten Antigene werden als violette querverlaufende Banden dargestellt. Immunoblot IgM Der Test ist seinem Prinzip nach identisch, in Schritt 2 wird das oben erwähnte Konjugat durch ein Alkalische Phosphatase - Anti-Humanes IgM-Konjugat ersetzt. Die Ermittlung wird folglich die Antigen-Banden nachweisen, die durch die in den Proben vorhandenen Toxoplasmose-Antikörper der Klasse IgM erkannt werden. Auswertung Der aufeinanderfolgende Vergleich der Streifen-Paare IgG und IgM ermöglicht das Feststellen des eventuellen Vorhandenseins von Banden, die sich nur in einer der proben entwickeln, und nicht in der anderen (vgl. § Auswertung).   TOXOPLASMOSE Bei der angeborenen Toxoplasmose handelt es sich um eine besondere Form der Toxoplasmose, an der das ungeborene Kind während der Schwangerschaft der Mutter erkrankt. Es kann schwerwiegende klinische Manifestationen beim Fötus oder bei der Geburt verursachen (Saadatnia & Golkar, 2012). Angeborene Toxoplasmose ist weltweit für 190.000 Fälle pro Jahr verantwortlich, mit einer geschätzten globalen Auswirkung von 1.200.000 Disability Adjusted Life Years (DALYs) (Torgerson & Mastroiacovo, 2013).   Fast jede angeborene Toxoplasmose entsteht als Folge einer Primärinfektion der Mutter während der Schwangerschaft, unabhängig davon, ob die Infektion symptomatisch ist oder nicht (Gangneux & Dardé, 2012).   Angeborene Toxoplasmose kann auch als Folge einer Reaktivierung der Toxoplasmose bei einer immungeschwächten Mutter auftreten, oder seltener, wenn die Primärinfektion der Mutter kurz vor der Schwangerschaft auftrat, insbesondere im Fall einer symptomatischen Toxoplasmose bei der Mutter oder, noch seltener, bei eine zweite Infektion mit einem Stamm, der virulenter ist als der erste Stamm, der die Mutter zuvor infiziert hat (Simon et al., 2020; Maldonado & Read, 2017).   Das klinische Erscheinungsbild einer angeborenen Toxoplasmose variiert stark und hängt von mehreren Faktoren ab, insbesondere vom Stadium der Schwangerschaft, in dem die Infektion auftrat: Je früher in der Schwangerschaft die Infektion auftritt, desto geringer ist die Wahrscheinlichkeit einer Infektion, aber desto schwerwiegender ist das klinische Erscheinungsbild (Wallon et al., 2013).  

LEISHMANIA Western blot (WB) IgG ist ein Einwegtest für den qualitativer serologischen IgG-Diagnose mittels Immunoblot-Assay auf Leishmaniose, der als Bestätigungstest bei einem positiven oder mehrdeutigen Ergebnis in klassischen Screeningtests vorgesehen ist.   TESTPRINZIP Western Blot-Technik Die Antigene (promastigote Form von Leishmania infantum) werden nach der Trennung durch Elektrophorese mittels Elektroblotting an die Oberfläche einer Nitrocellulosemembran gebunden (Transfer genannt), die in 24 von 1 bis 24 nummerierte Streifen geschnitten wird.   DURCHFÜHRUNG Jede zu prüfende Serumprobe wird separat mit einem Streifen inkubiert. Die potenziell in der Probe vorhandenen Anti-Leishmania-Antikörper binden selektiv an die Antigene von L. infantum. Das alkalische Phosphatase Anti-Human-IgG-Konjugat bindet dann an die gebundenen Anti-Leishmania-Antikörper. Abschließend reagieren die Immunkomplexe mit dem Substrat. Die in den Proben vorhandenen, von den Anti-Leishmania-Antikörpern erkannten Antigene vom Typ IgG werden als violette querverlaufende Banden dargestellt.   LEISHMANIOSE Leishmaniosen sind parasitäre Erkrankungen des Monozyten-Makrophagen-Systems, deren Erreger ein begeißeltes Protozoon der Gattung Leishmania ist. Die Übertragung erfolgt nachts durch die weiblichen Phlebotominae. Der Parasit, der mehr als fünfzig verschiedene Arten umfasst, darunter 20, die Menschen infizieren, weist eine zoonotische oder anthroponotische Übertragung vom Vektor auf das Säugetierreservoir auf (Lachaud et al., 2017).   Der Parasit durchläuft in seinem Lebenszyklus zwei morphologische Stadien: eine begeißelte Promastigotenform, extrazellulär und mobil, die im Verdauungsschlauch der Phlebotominae vorkommt. Die amastigote Form, unbeweglich und intrazellulär, vermehrt sich aktiv innerhalb der Makrophagen des Säugetierwirts bis zu ihrer Lyse und setzt sie frei, um andere Makrophagen zu infizieren (Pace, 2014).   Die Krankheit ist auf vier Kontinenten (Afrika, Latein- und Südamerika, Europa) endemisch, wobei weltweit 10 bis 20 Millionen Menschen im Verdacht stehen, infiziert zu sein, jedes Jahr 400.000 neue Fälle von viszeraler Leishmaniose auftreten und 350.000.000 Menschen einem Infektionsrisiko ausgesetzt sind (Okwor & Uzonna). , 2016).   Es werden drei Formen von Leishmaniosen beschrieben: viszerale, kutane oder mukokutane, es gibt auch asymptomatische Träger. Die klinischen Symptome unterscheiden sich je nach Leishmania-Art und der Immunantwort des Wirts.   Asymptomatische Formen kommen in Endemiegebieten sehr häufig vor, wo die Prävalenz hoch ist: 12,5 % der Blutspender sind in der Region Bologna asymptomatisch (Ortalli et al., 2019).  

SCHISTO II Western Blot (WB) IgG ist ein Einwegtest für den qualitativer serologischen IgG-Diagnose mittels Immunoblot-Assay auf Bilharziose (Schistosomiasis), der als Bestätigungstest bei einem positiven oder mehrdeutigen Ergebnis in klassischen Screeningtests vorgesehen ist.   TESTPRINZIP Western Blot-Technik Die Antigene (adulte Exemplare von Schistosoma mansoni + Schistosoma haematobium) werden nach der Trennung durch Elektrophorese mittels Elektroblotting an die Oberfläche einer Nitrocellulosemembran gebunden (Transfer genannt), die in 24 von 1 bis 24 nummerierte Streifen geschnitten wird.   DURCHFÜHRUNG Jede zu prüfende Serumprobe wird separat mit einem Streifen inkubiert. Die potenziell in der Probe vorhandenen Anti-Schistosoma-Antikörper binden selektiv an die Antigene von Schistosoma. Das alkalische Phosphatase Anti[1]Human-IgG-Konjugat bindet dann an die gebundenen Anti-Schistosoma-Antikörper. Abschließend reagieren die Immunkomplexe mit dem Substrat. Die in den Proben vorhandenen, von den Anti-Schistosoma-Antikörpern erkannten Antigene vom Typ IgG werden als violette querverlaufende Banden dargestellt.   SCHISTOSOMIASIS Schistosomiasis sind Zoonosen, die durch die Infektion durch hämatophage Trematoden der Gattung Schistosoma verursacht werden, die im Kreislaufsystem leben. Sechs Arten sind für den Menschen pathogen: S. haematobium, S. mansoni, S. japonicum (die 3 Hauptarten), S. mekongi, S. intercalatum und S. guineensis. Sie sind für drei Formen der Infektion verantwortlich: intestinale, urogenitale oder arteriovenöse.   Die verschiedenen Arten haben einen ähnlichen Lebenszyklus. Sie unterscheiden sich durch die Art ihrer Zwischenwirte, Wasserschnecken, die eine entscheidende Rolle in der Epidemiologie der Krankheit spielen. Die verschiedenen Arten unterscheiden sich auch in der Physiopathologie der Krankheit in ihrer chronischen Phase (Urin-Bilharziose bei S. haematobium, arteriovenöse Bilharziose bei S. japonicum und S. mekongi, intestinale bei den anderen). Jede Art hat ihr eigenes Endemiegebiet, es können jedoch mehrere Arten im selben Gebiet vorkommen.